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我國(guó)開發(fā)媲美液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的專一性生物傳感器
2022-03-17 15:58:56科技部閱讀量：432 我要評(píng)論
【化工機(jī)械設(shè)備網(wǎng) 熱點(diǎn)關(guān)注】 2-羥基戊二酸(2-Hydroxyglutarate，2-HG)是2-酮基戊二酸(2-Ketoglutarate，2-KG)的結(jié)構(gòu)類似物，存在兩種手性異構(gòu)體L-2-HG和D-2-HG。2-HG可抑制多種2-KG依賴性雙加氧酶、轉(zhuǎn)氨酶的活性，通過(guò)抑制抑癌基因活性、改變細(xì)胞表觀遺傳水平等方式，引起惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤、急性髓細(xì)胞性白血病、肝內(nèi)膽管癌等癌癥的發(fā)生。建立2-HG高效、專一性的檢測(cè)方法有助于2-HG相關(guān)疾病的診療。
近期，上海交通大學(xué)和山東大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)在 Nature Communications 雜志上發(fā)表題為“A D-2-hydroxyglutarate biosensor based on specific transcriptional regulator DhdR”的研究論文。研究揭示了反硝化無(wú)色桿菌NBRC 15125中D-2-HG分解代謝的調(diào)控機(jī)制，鑒定了可專一性響應(yīng)于D-2-HG的DhdR(一種轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子)，并基于DhdR和AlphaScreen(一種熒光放大分析技術(shù))，開發(fā)了一種D-2-HG生物傳感器。該研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)對(duì)DhdR的DNA結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行定點(diǎn)突變，實(shí)現(xiàn)了D-2-HG生物傳感器靈敏度及檢測(cè)范圍的優(yōu)化，獲得了檢測(cè)限0.10 μM，檢測(cè)范圍0.3–20 μM的傳感器BD2HG-1。BD2HG-1可用于血清、尿液及細(xì)胞培養(yǎng)基等不同類型生物樣本中的D-2-HG的定量檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)果具有較高一致性。
該研究提供了一種D-2-HG定量檢測(cè)的新方法和途徑，有望在D-2-HG相關(guān)疾病的診斷與治療以及靶向藥物的開發(fā)等方面發(fā)揮重要作用。
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