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                      貂源性成分（Martes）核酸檢測試劑盒說明

雖然寒霜降臨，可青松爺爺還穿著碧綠碧綠的長袍，顯得更加蒼翠?；▓@里，菊花爭芳斗艷，紅的如火，粉的似霞，白的像雪，美不勝收。柿子樹上的葉子全都落了，可黃澄澄的柿子還掛在枝頭，像一個(gè)個(gè)大大小小的橘黃燈籠，紅彤彤的海棠樹把樹枝都壓彎了.接下來介紹貂源性成分（Martes）核酸檢測試劑盒說明

技術(shù)特點(diǎn)：

1準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對照試驗(yàn)＞1000例，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對，結(jié)果一致性大于99%。

2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。

3快速：整個(gè)檢測流程只需3小時(shí)。

4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。

5防污染

6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光

 

反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。