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          驢源性成分（Don）核酸檢測試劑盒技術(shù)特點(diǎn)說明

北國的落葉，渲染出一派多么悲壯的氣氛！落葉染作金黃色，或者竟是朱紅紺赭罷。初墜落的，也許只是那么一片兩片，像一只兩只斷魂的金蝴蝶。但接著，便有嘩嘩的金紅的陣雨了。接著，便在樹下鋪出一片金紅的地毯。而在這地毯之上，鐵鑄也似的，豎著光禿禿的疏落的樹干和枝椏，直刺著高遠(yuǎn)的藍(lán)天和淡云。接下來介紹  驢源性成分（Don）核酸檢測試劑盒技術(shù)特點(diǎn)說明

技術(shù)特點(diǎn)：

1準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)＞1000例，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對(duì)，結(jié)果一致性大于99%。

2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。

3快速：整個(gè)檢測流程只需3小時(shí)。

4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑，使體系配置操作簡便。

以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。