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基因轉(zhuǎn)移方法 向動物體內(nèi)轉(zhuǎn)入外源基因 這一方法的嘗試是從 70 年代中期開始的,到 80 年代,科學(xué)家們已經(jīng)相 繼建立了多項轉(zhuǎn)基因技術(shù)。 顯微注射法 這種方法是 1981 年由美國科學(xué)家戈登(Gordon)等人首 先實(shí)驗(yàn)成功的。他們將小鼠的受精卵取出來,在顯微鏡下將胸苷激酶基因用 玻璃微管送入受精卵的雄原核,然后立刻輸入假孕母鼠的輸卵管中,使其在 子宮內(nèi)著床,蕞終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠。在此后約一年多時間內(nèi),人的珠蛋白 基因和胰島素基因也被轉(zhuǎn)入了小鼠。隨后,生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因小鼠的經(jīng)驗(yàn)迅速地被 移植到生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因家畜上。到 1985 年,哈默(Hammer)等人首先報道用顯微 注射法生產(chǎn)出轉(zhuǎn)基因兔、羊和豬。顯微注射雖然是有效的方法,但轉(zhuǎn)基因動 物生產(chǎn)仍是一項困難的技術(shù),即使具備了良好的設(shè)備和訓(xùn)練有素的技術(shù)人 員,注射和移植一百個小鼠胚胎,僅能獲得五只轉(zhuǎn)基因小鼠。家畜的胚胎細(xì) 胞核不易看清,不能直接注射,必須先作離心處理后才能注射,這樣,生產(chǎn) 轉(zhuǎn)基因個體的機(jī)率又下降了一個數(shù)量級。魚類和兩棲類的卵是多黃卵,在顯 微鏡下不易辨認(rèn)原核,有些科學(xué)家采用基因注入卵母細(xì)胞核的方法,因?yàn)槁?母細(xì)胞核大些,可以在顯微鏡下看見,基因可以注入卵母細(xì)胞核中,讓卵母 細(xì)胞體外成就并受精,蕞終受精卵發(fā)育成小魚。 |